（一）制备定制活化酯
常见活化酯类型：
Sulfo-NHS酯、TFP酯、STP酯。
活化步骤：
试剂：需碳二亚胺（如EDC）和活化剂（如Sulfo-NHS）。
缓冲液：
活化阶段：0.1 M MES + 0.5 M NaCl (pH 6.0) 。
偶联阶段：0.1 M PBS (pH 7.2–7.5) 或其他无胺缓冲液。
步骤概要：
将AFDye 488 Carboxylic Acid溶于活化缓冲液。
加入EDC（目标分子摩尔量的10倍）和Sulfo-NHS（终浓度5 mM）。
展开剩余80%室温反应15分钟。
（二）固相合成多肽修饰
原位活化：在固相载体上直接使用偶联试剂（如HATU）激活羧基，与肽链氨基反应。
溶剂：DMF或DMSO溶解染料后加入合成体系。
（三）直接标记生物分子
标记对象：蛋白质、抗体、核酸等含伯胺分子。
步骤：
染料溶解：用无水DMSO配成1–10 mM储备液。
反应体系：
缓冲液：PBS (pH 7.4) 或碳酸盐缓冲液 (pH 8.0–9.0)，避免含胺缓冲液（如Tris）。
摩尔比：染料:目标分子 = 5:1 至 10:1 。
温度与时间：室温1–2小时或4℃过夜。
避光操作：全程避光防止荧光淬灭。
试剂信息英文名称：AFDye 488 Carboxylic Acid (Alexa Fluor 488 Carboxylic Acid Equivalent)
同义名：AFDye 488 Acid; AFDye 488羧酸
分子式：C21H12N2O11S22-
分子量：532.46 g/mol
状态：固体
Ex/Em：500/525 nm
溶解性： 溶于水，DMF，DMSO
纯度：≥95%
生产厂商：西安强化生物科技
&应用领域（一）生物分子标记
蛋白质/抗体标记：制备荧光抗体，用于流式细胞术、 免疫荧光（IF/IHC） 和活细胞成像。
核酸标记：通过点击化学（如与炔烃修饰寡核苷酸反应）追踪基因表达。
多肽修饰：固相合成中直接偶联，用于受体-配体结合研究。
（二）药物与材料科学
药物载体示踪：标记海藻酸钠等载体，实时追踪药物递送；
生物材料标记：制备荧光功能化组织工程支架。
&相关试剂Liproxstatin-1
(1S,3R)-RSL3
Prostaglandin A1
Prostaglandin B2
Prostaglandin D2
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本试剂用于科研领域，其他用途概不适用！
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